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本发明公开了一种基于BRCA2蛋白、mRNA诊断奶牛是否妊娠的方法及用途，涉及蛋白质检测领域。基于BRCA2蛋白诊断奶牛是否妊娠的方法包括以下步骤：分别采集待检测奶牛人工授精0天、人工授精18天的血液样本；测定奶牛人工授精0天、人工授精18天的血液样本中BRCA2蛋白的含量C1、C2，判定C2大于等于1.6C1，确定待检测奶牛已经妊娠。BRCA2蛋白的用途，用于诊断奶牛是否妊娠。本发明能够在奶牛人工授精后18天进行妊娠诊断，只需要采集少量的奶牛血液就可以进行诊断，能够减少对奶牛生殖系统的损伤，节约劳动力，能够有效降低饲养管理的成本，提高奶牛场的经济效益。